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发布时间:2021-08-13

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一文了解各种新冠突变体!


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疾病预防控制中心和世界卫生组织建立了区分新出现的SARS-CoV-2变体的分类系统:Variants of Concern (VOCs)和Variants of interest(VOIs)。如Alpha (B.1.1.7)、Beta (B.1.351)、Gamma (P.1)、Delta (B.1.617.2)和Omicron(B.1.1.529),均与传播性和毒力增强有关,被列为VOCs;如Lambda(C.37)、Mu (B.1.621)被列为VOIs。


SARS-CoV-2 Variants of Concern (VOCs)


Alpha (B.1.1.7 lineage)

Alpha(B.1.1.7)突变株于2020年12月底,在英国报告的新突变体。此毒株在2020年底迅速扩散,2021年1月初仅占美国过去两周内新冠感染病例的0.2%;2月底,占比上升至11.4%;而到了4月,占比上升至66%;到5月8日已升至72.4%,成为主流变异毒株。


Alpha株包含17个突变,其中有8个突变(Δ69-70 deletion, Δ144 deletion, N501Y, A570D,P681H, T716I, S982A, D1118H) 位于Spike 蛋白(S蛋白,病毒入侵关键蛋白)中。N501Y突变表现出Spike蛋白与ACE2受体亲和力提高,增强了病毒附着并随后进入宿主细胞。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Alpha突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA136

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer   Protein (Alpha 501Y.V1,Mammalian, C-6His)

DRA133

Recombinant SARS-CoV-2 S1 Protein   (Alpha 501Y.V1, Mammalian, C-6His)

XCV04

SARS-CoV-2 Alpha (B.1.1.7,   D614G)-GFP-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed cell

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2   S-IgG1 Neutralizing Antibody



Beta(B.1.351 lineage)

Beta(B.1.351)突变株,Tegally等报道的一种新变体。该病毒于2020年10月在南非纳尔逊·曼德拉湾引发了第二波新冠病毒感染。


Beta株的Spike蛋白包含9个突变 (L18F、D80A、D215G、R246I、K417N、E484K、N501Y、D614G、A701V),其中3个突变 (K417N、E484K、N501Y) 位于RBD区域(S蛋白上与ACE2受体结合关键区域),提高了与ACE2受体的结合亲和力。据报道,该变体具有较高的传播风险,并降低了单克隆抗体治疗、恢复期血清和疫苗接种后血清的中和作用。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Beta突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA153

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer Protein (Beta 501Y.V2, Mammalian, C-6His

DRA125

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Beta 501Y.V2, Mammalian, C-6His)

DRA126

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Beta 501Y.V2, Mammalian, C-Fc)

DRA135

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Beta 501Y.V2, Mammalian, C-mFc)

XCV05

SARS-CoV-2 Beta (501Y.V2)-GFP-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1 Neutralizing Antibody


Gamma (P.1 lineage)

Gamma(P.1)突变株于2020年12月在巴西被确认,并于2021年1月在美国首次发现。根据世卫组织2021年3月30日发布的最新流行病学信息,该变体已蔓延至45个国家。


Gamma株的Spike蛋白有10个突变 (L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、H655Y、T1027IV1176、K417T、E484K和N501Y),有三个突变(L18F、K417T、E484K)位于RBD区域,与Beta株相似。重要的是,这种变体可能降低单克隆抗体治疗、恢复期血清和接种后血清的中和作用。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Gamma突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA157

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer Protein (Gamma P.1, Mammalian, C-6His)

DRA144

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Gamma P.1, Mammalian, C-6His)

DRA143

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Gamma P.1, Mammalian, C-mFc)

XCV06

SARS-CoV-2 Gamma (P.1)-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1 Neutralizing Antibody



Delta(B.1.617.2 lineage)

Delta(B.1.617.2)突变株,最初于2020年12月在印度发现,是导致2021年4月印度出现第二波致命COVID-19感染的原因。在美国,这种变体于2021年3月首次发现,并成为美国未来几周最主要的SARS-CoV-2毒株。2021年7月,南京爆发的新冠疫情,通过对疫情中的病例基因组测序结果显示,毒株为delta突变株。


Delta株的Spike蛋白含有10个突变(T19R, (G142D*), 156del, 157del, R158G,L452R, T478K, D614G, P681R, D950N),具有对人体适应性更强、传播速度更快、病毒载量更高、治疗所需时间更长、更容易发展成重症等特点。此外,Delta突变株能够逃避免疫系统产生的中和抗体的中和能力,Moderna公司发布的研究显示,与含有D614G变异的野生型新冠病毒株相比,mRNA-1273新冠疫苗接种者血清对Delta突变株的中和能力降低了2.1倍。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Delta突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA168

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer Protein (Delta B.1.617.2, Mammalian, C-6His)   

DRA166

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Delta B.1.617.2, Mammalian, C-6His)

XCV08

SARS-CoV-2 Delta (B.1.617.2)-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2S-IgG1 Neutralizing Antibody



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Omicron(B.1.1.529 lineage)


2021年11月26日,世界卫生组织(WHO)正式将新冠病毒突变株B.1.1.529升级为令人担忧的突变株(Variant of Concern, VOC),其系统命名定为奥密克戎(Omicron),最早于2021年11月9日在南非首次检测到。


Omicron Spike蛋白至少有30个氨基酸突变,其突变数量已经超过了之前在国际上占据主导地位的Delta突变株,成为迄今为止发现突变最多的新冠病毒变异毒株。此外,Omicron Spike蛋白30个氨基酸突变中有15个突变在RBD区域中,而Delta RBD区域中仅有2个突变

Omicron和Delta Spike蛋白氨基酸突变位点


Omicron和Delta 突变株RBD区域氨基酸突变位点


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Omicron突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA193

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer Protein (Omicron,B.1.1.529, Mammalian, C-6His)   

DRA191

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Omicron, B.1.1.529, Mammalian, C-Fc)

DRA192

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Omicron, B.1.1.529, Mammalian, C-Fc)

XCV13

Omicron(B.1.1.529)-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2S-IgG1 Neutralizing Antibody




SARS-CoV-2 Variants of interest (VOIs)


Mu (B.1.621)

Mu变种,也被称为谱系B.1.621或VUI-21JUL-1,于2021年1月在哥伦比亚首次发现。Mu基因组共有21个突变,包括9个氨基酸突变。位于刺突蛋白的突变有T95I、Y144S、Y145N、R346K、E484K以及与免疫逃逸有关的N501Y、D614G、P681H和D950N。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Mu突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA185

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Mu B.1.621, Mammalian, C-6His)

DRA183

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Mu B.1.621, Mammalian, C-mFc)

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2S-IgG1 Neutralizing Antibody




Lambda(C.37)

Lambda(C.37)突变株最初在秘鲁发现医学界首次注意到Lambda时,200个受检样本仅能检出1例。到2021年3月,秘鲁首都利马约50%新冠病例源于该变异株感染。WHO数据表明,今年五六月间,秘鲁82%的新增病例源于Lambda变异株感染,人均新冠死亡率飙升至世界第一目前,该突变株已经在包括秘鲁、智利、阿根廷和厄瓜多尔在内的数十个南美国家传播,英国等国家也已经发现Lambda突变株感染者。


Lambda株在Spike蛋白上发生多处变异,主要包括G75V、T76I、del247/253、L452Q、F490S、D614G和T859N其中RSYLTPGD246-253N、L452Q和F490S突变,导致其对免疫抵抗力增强;并且T76I和L452Q突变,导致其传染性增强。这让Lambda毒株同时具备了传染性增加和免疫逃逸能力增加的能力,从而获得了大规模传播的潜力。

助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Lambda突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA169

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Lambda C.37, Mammalian, C-6His)

DRA170

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Lambda C.37, Mammalian, C-mFc)

XCV09

SARS-CoV-2 Lambda (C.37)-Luc假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1 Neutralizing Antibody




SARS-CoV-2 其他突变株



Epsilon (B.1.427 and B.1.429)

Epsilon (B.1.427和B.1.429)突变株,于2020年6月左右在美国出现,从2020年9月1日至2021年1月29日,在测序病例中从0%增至50%,与野生型流行毒株相比传播性增加了18.6-24%。


Epsilon株带有以下突变 (B.1.427: L452R, D614G; B.1.429:S13I, W152C, L452R, D614G)。由于其传播能力增强,美国疾病控制与预防中心将该毒株列为VOI(Variants of Interest,关注变种)。

助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Epsilon突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA146

Recombinant SARS-CoV-2S Protein RBD (Epsilon CAL.20C, Mammalian, C-6His) 

DRA152

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Epsilon CAL.20C, Mammalian, C-mFc)

XCV07

SARS-CoV-2 Epsilon (B.1.429)-Luc 假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2S-IgG1 Neutralizing Antibody



Zeta (P.2)


Zeta (P.2)突变株于2020年4月在巴西首次发现。其Spike蛋白具有关键突变 (L18F; T20N; P26S; F157L; E484K; D614G; S929I; V1176F) ,由于此变体对于抗体治疗和疫苗血清的中和作用可能降低,被世界卫生组织和美国疾病控制与预防中心列为VOI。


Eta (B.1.525)与Lota(B.1.526)

Eta (B.1.525)和Lota (B.1.526)突变株于2020年11月在纽约首次发现,由于此突变株对于抗体治疗和疫苗血清中和作用可能降低,CDC和世卫组织将其列为VOI。8月10日,据《医疗新闻》杂志报道,美国纽约卫生部门研究团队判断,在美国纽约发现的新冠病毒变异株Iota (B.1.526)致死率显著提高。在研究期间,与其他新冠变异毒株相比,45~65岁、65~74岁以及75岁以上的感染人群死亡率分别提高46%、82%和62%。


其Spike蛋白具有关键突变 (B.1.525: A67V, Δ69/70, Δ144,E484K, D614G, Q677H, F888L; B.1.526: (L5F*), T95I, D253G, (S477N*), (E484K*),D614G, (A701V*))。


助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Eta突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA154

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer   Protein (Eta B.1.525, Mammalian, C-6His)


Theta (P.3)

Theta (P.3)突变株,其Spike蛋白携带关键突变(141-143 deletion E484K; N501Y; P681H),并于2021年2月在菲律宾和日本首次发现。曾经是VOI,后来因为这些突变株的病例数不断减少,对疫情影响越来越低,现在已被降级为 “需要进一步监控的突变株”(alerts for further monitoring)


Kappa(B.1.617.1)

Kappa(B.1.617.1)突变株携带关键突变((T95I)、G142D、E154K、L452R、E484Q、D614G、P681R和Q1071H),于2020年12月在印度首次发现。与Delta突变株同属于印度变异病毒的亚种之一。Spike蛋白发生重大突变的特性使得Kappa病毒跟Delta一样,更易感染细胞并避开免疫系统的抗体反应。

助力新型冠状病毒变异株的相关研究及疫苗的开发和评估,近岸蛋白质研发出Kappa突变株蛋白。

货号

产品名称

DRA155

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Kappa B.1.617, Mammalian, C-6His)

DRA156

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein RBD (Kappa B.1.617, Mammalian, C-mFc)

XCV11

SARS-CoV-2 Kappa (B.1.617.1)-Luc假病毒

XCC14

293-ACE2 Overexpressed Cells

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1 Neutralizing Antibody


其他突变体蛋白详见下表。

货号

产品名称

DRA57

Recombinant SARS-CoV-2 S1 Protein   (D614G, Mammalian, C-10His)

DRA50

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD-SD1(V367F, Mammalian, C-6His)

DRA51

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD-SD1(N354D, D364Y, Mammalian, C-6His)

DRA52

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD-SD1(W436R, Mammalian, C-6His)

DRA73

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (F342L, Mammalian, C-6His)

DRA74

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N354D, Mammalian, C-6His)

DRA75

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (R408I, Mammalian, C-6His)

DRA76

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (V367F, Mammalian, C-6His)

DRA77

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (A435S, Mammalian, C-6His)

DRA78

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (K458R, Mammalian, C-6His)

DRA79

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (G476S, Mammalian, C-6His)

DRA80

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (V483R, Mammalian, C-6His)

DRA81

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (D364Y, Mammalian, C-6His)

DRA82

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (V341I, Mammalian, C-6His)

DRA101

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N439K, Mammalian, C-6His)

DRA120

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N501Y, Mammalian, C-6His)

DRA121

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N501Y, Mammalian, C-Fc)

DRA128

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N501Y, Mammalian, C-mFc)

DRA145

Biotinylated SARS-CoV-2 S Protein   RBD (N501Y, Mammalian, C-6His-Avi)

DRA129

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (E484K, Mammalian, C-mFc)

DRA134

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (E484K,Mammalian, C-6His)

DRA139

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (Y453F, Mammalian, C-6His)

DRA159

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (E484Q, Mammalian, C-mFc)

DRA161

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (E484Q, Mammalian, C-6His)

DRA165

Recombinant SARS-CoV-2 S Protein   RBD (B.1.620, Mammalian, C-6His)

DRA59

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer   Protein (D614G, Mammalian, C-6His)

DRA100

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer   Protein (D614G, N439K, Mammalian, C-6His)

DRA112

Recombinant SARS-CoV-2 S-trimer   Protein (Y453F, D614G, Mammalian, C-6His)

DRA113

Recombinant SARS-CoV-2 ΔFVI-S   trimer Protein (Mammalian, C-6His)


自2019年新冠疫情爆发以来,近岸蛋白质研发上线SARS-CoV-2系列产品上百余种,包括ACE-2S-RBDS-NTDS-CTDS-trimerNucleocapsid ProteinN-CTDN-NTDNSP非结构蛋白流行突变株蛋白N和S抗体中和抗体ACE-2过表达细胞株假病毒等,可用于新冠检测试剂盒研发、中和抗体/疫苗效价评估、病毒侵染细胞研究等。


SARS-CoV-2突变株蛋白

Alpha(B.1.1.7)

Beta (B.1.351)

Gamma (P.1)

Delta (B.1.617.2)

Lambda (C.37)

Kappa (B.1.617.1)

Epsilon (B.1.429)

Eta B.1.5

Mu (B.1.621)

C.1.2




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假病毒侵染验证

中和抗体可阻止病毒侵染细胞,在病毒感染细胞系统中加入中和抗体(注射疫苗后的血清/中和抗体阳性对照),检测被侵染细胞减少情况,计算其阻断效果。


因新冠病毒的高传染性及致病性,使用新冠活病毒进行侵染验证必须在生物安全三级以上实验室进行,受实验室条件和病毒来源的限制。另外,由于病毒株、培养条件以及对结果的评估标准不同,不同实验室的活病毒检测结果常存在一些差异。从安全性以及可操作性,使用假病毒更方便,且假病毒易于实现标准化,利于评估临床前及临床阶段的疫苗的抗病毒效果。通过对比不同的突变株假病毒株对免疫后的血清样本进行中和抗体的检测,可以有效的评估该疫苗对突变株的中和效果。


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中和抗体抑制新冠假病毒侵染细胞(来源:www.novoprotein.com.cn)


假病毒检测系统:新冠假病毒(Novoprotein Cat.XCV03)无自我复制能力,其表面表达S全长蛋白,内含绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luciferase)报告基因,可以特异性侵染表达ACE-2的细胞(Novoprotein Cat.XCC14)。被病毒侵染后的细胞即表达GFP和Luciferase,发出荧光,从而可以便捷观察结果,并通过化学发光酶标仪检测,实现定量分析。假病毒测定法可通过进一步优化实现高通量检测和标准化检测。通过替换S蛋白表达质粒(蛋白质编码基因),可以研究抗S蛋白抗体针对不同突变株的交叉中和作用。


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货号

产品名称

XCC14

293-ACE2 Overexpressed cell

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1   Neutralizing Antibody

XCV01

SARS-CoV-2 (D614G)-Luciferase 假病毒

XCV02

SARS-CoV-2 (D614G)-GFP 假病毒

XCV03

SARS-CoV-2 (D614G)-GFP-Luc 假病毒

XCV04

SARS-CoV-2 Alpha (B.1.1.7,   D614G)-GFP-Luc 假病毒

XCV05

SARS-CoV-2 Beta (501Y.V2)-GFP-Luc 假病毒

XCV06

SARS-CoV-2 Gamma (P.1)-Luc 假病毒

XCV08

SARS-CoV-2 Delta (B.1.617.2)-Luc 假病毒

XCV07

SARS-CoV-2 Epsilon (B.1.429)-Luc 假病毒

XCV09

SARS-CoV-2   Lambda (C.37)-Luc 假病毒


免疫阻断验证

病毒侵染验证法是从细胞水平来验证中和抗体的效用,适用于疫苗研发阶段。利用突变株的蛋白,针对大规模疫苗接种后的人群,可快速评估每个人的中和抗体对突变株的保护效果,可使用更简单快捷的免疫阻断验证法。


免疫阻断验证利用中和抗体阻断S-RBD蛋白与ACE-2结合的原理,通过加入中和抗体后,检测结合在ACE-2上S-RBD蛋白的减少量来计算中和抗体的滴度。



时间分辨荧光免疫层析检测中和抗体竞争性抑制S-RBD结合ACE-2 (来源:www.novoprotein.com.cn)


使用同样的免疫阻断原理,也可采取ELISA或者侧向层析胶体金法检测中和抗体。

ELISA,中和抗体阻断S蛋白与ACE-2结合,IC50为25ng/ml (来源:www.novoprotein.com.cn)


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货号

产品名称

DRA136/153/157/168/154

英国(Alpha 501Y.V1)南非( Beta 501Y.V2)/  巴西(Gamma P.1)/  Delta(B.1.617.2) Eta (B.1.525) 等突变株S-trimer蛋白

DRA100

D614G, N439K S-trimer蛋白

DRA59

D614G S-trimer蛋白

DRA122

野生型 S-trimer蛋白


T细胞免疫应答评估

目前一些研究表明,在抵抗新冠时,仅靠诱导中和抗体应答并不能充分保护机体,T细胞的免疫应答也具有非常重要的作用。有研究表明,所有完全康复的个体都能检测到中和抗体、辅助T细胞和杀伤T细胞,总体而言,具有广泛、协调良好的免疫反应的人,其病症较轻,特别的,强烈的新冠病毒特异性T细胞反应是较轻症状的前兆。一些轻症患者即使没有检测到病毒特异性抗体反应,也会触发强烈的记忆T细胞反应。65岁以上的人更有可能出现T细胞反应不良和免疫反应不协调的情况,因此会出现更严重或更致命的COVID-19。老年人对COVID-19的大量易感性部分似乎是一种较弱的适应性免疫反应,这可能是因为老年人的初始T细胞较少。另外,疫苗接种后的记忆T细胞更是会持续性保护机体,所以,评估疫苗诱导的T细胞免疫反应至关重要。


有研究发现在未感染新冠的人群中也检测到了新冠病毒N蛋白特异性T细胞,而且SARS康复患者中的特异T细胞与SARS-CoV-2 具有强大交叉反应性。这表明,常见的β冠状病毒感染可诱导人体产生对冠状病毒结构蛋白NP的多特异性和持久的T细胞免疫。所以验证疫苗所诱导的特异性T细胞应使用新冠特异性的S-trimer Protein(Novoprotein Cat. DRA49)为主。 


评估疫苗引发的T细胞免疫反应,金标准是IFN-γ ELISpot检测PBMC(外周血单核细胞)的免疫应答,即使用S蛋白分别刺激疫苗接种前后同一志愿者体内的PBMC,接种后T细胞分泌的IFN-γ程度应该是接种前数倍。


酶联免疫斑点技术(Enzyme-Linked Immunospot Assay,ELISpot)可从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞。IFN-γ作为免疫活性细胞分泌的细胞因子在诱导抗病毒免疫中起着重要的免疫调理作用,包括激活细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)细胞和吞噬细胞等,而在疫苗免疫后机体产生IFN-γ的水平实际上反映辅助性T细胞的活动。因此,使用ELISpot检测IFN-γ的水平就是间接地检测辅助性T细胞活性。


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ELISpot检测PBMC分泌IFN-γ 


IFN-γ ELISpot操作流程

1、用抗IFN-γ的单克隆抗体包被在检测孔的底部;

2、分离待检测样本PBMC;

3、将待测PBMC放入检测孔,同时加入刺激物S-trimer Protein(Novoprotein Cat.DRA49)。在培养期间,对S蛋白有反应的T淋巴细胞就会被激活,开始分泌特定的细胞因子IFN-γ,这些细胞因子同时被板底的单克隆抗体捕获;对S蛋白没有反应的细胞则不受刺激,也不分泌特定的细胞因子IFN-γ;

4、移出细胞,板底留下细胞因子的潜在“影像”;

5、加入生物素标记的检测抗体,检测抗体与“影像”上的细胞因子结合,形成“抗体-抗原-抗体”的夹心结构;

6、加入链霉亲和素标记的酶溶液,通过链霉亲和素与检测抗体上标记生物素结合,形成复合物;

7、加入显色底物,在酶的催化分解下,生成不可溶的色素,就近沉淀在局部的膜上形成斑点并计数。


每一个斑点代表了一个对特异抗原有反应的特异性T淋巴细胞。通过使用不同的突变株蛋白,可评估T细胞对突变株的免疫反应,从而评估该疫苗对突变株的保护效果。斑点的数目多少就反映了样本的细胞免疫的识别状态:斑点多说明免疫识别状态好,斑点少说明免疫识别状态差或者出现免疫耐受。


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货号

产品名称

C05Y/DRA106/110

ACE-2

DA034/35/36

Anti-SARS-CoV-2 S-IgG1   Neutralizing Antibody

DRA42/72

野生型RBD蛋白

DRA125126135/DRA143、  144/DRA166/DRA169170/DRA146152/DRA155156,DRA133

南非( Beta 501Y.V2)/  巴西(Gamma P.1)/  Delta(B.1.617.2)/  Lambda( C.37)/  美国加州(Epsilon CAL.20C)/  印度(Kappa B.1.617.1) 等突变株RBD蛋白英国(Alpha 501Y.V1) S1蛋白


疫苗的研发阶段验证,临床实验验证加上接种后的中和抗体检测,构筑起整个疫苗效价评估体系。


随着疫苗实验进展频繁出现好消息,隧道的尽头已然出现曙光,未来会有不同种类的新冠疫苗可供世界选择,不久的将来我们会迎来不需要口罩的晴天。




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