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发布时间:2018-12-06

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荀鲁盈/谷立川合作团队在常规DNA克隆技术取得重要进展

近日,山东大学微生物技术国家重点实验室的荀鲁盈教授和谷立川教授团队在《Nucleic Acids Research》上发表了一篇题为《T5 exonuclease-dependent assembly offers a low-cost method for efficient cloning and site-directed mutagenesis 》的文章。夏永振讲师是本论文第一作者,荀鲁盈教授与谷立川教授为共同通讯作者。

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DNA组装作为一种方便快捷高效的DNA克隆手段已经在生物学领域得到广泛的应用,各种商业化的组装试剂盒更是层出不穷。其中,著名的Gibson组装(NEB)是DNA组装技术的奠基之作,Gibson方法功能强大,方便快捷的特点,逐渐被越来越多地用于生物学实验室的日常普通克隆。

荀鲁盈教授和谷立川教授团队在掌握当前多种DNA组装试剂盒原理的基础上,联合开发了一种DNA组装方法,将之命名为TEDA(T5 exonuclease-dependent assembly)。研究人员对Gibson组装方法的各种组分进行了测试优化,发现在常规克隆的应用中,仅利用含有T5核酸外切酶和PEG8000的一种简单缓冲体系在30℃反应40min的组装效率要明显高于原Gibson组装。新开发的TEDA方法配置简单、效果稳定,极大地降低了成本。

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在研究过程中,研究团队使用了Novoprotein的 2×HotStart Taq plus Master Mix(目录号:E028),高灵敏度、特异性强,小伙伴们如有需求可以大力call我哦!In addtionNovo君也倾情推荐我们无缝克隆试剂盒(目录号:NR005),简单方便快捷高效,大幅度提高实验效率的同时大幅度节约实验经费,实乃构建克隆的必备神器!

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